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2020版《中國藥典》 | 睿科中藥材中黃曲霉毒素測定的解決方案

潤澤儀器商城 - 2021-01-27

1.介紹

黃曲霉毒素（Aflatoxins, AF）是一類由黃曲霉和寄生曲霉產生的代謝產物，具有誘發人體致畸、致癌、致突變的作用，主要的污染物有黃曲霉毒素B1, B2, G1, G2。中藥材大多以天然植物為基源，在儲存不當或因其他外界條件影響時，易受霉菌污染產生黃曲霉毒素。因此對中藥材進行黃曲霉毒素的高效便捷檢測是十分有必要的。

參考2020年版《中國藥典》四部通則中《2351 真菌毒素測定法黃曲霉毒素測定法》第一法，試樣經過70%甲醇水提取，提取液經稀釋、離心后，使用Raykol Fotector Plus高通量全自動固相萃取儀，濾液自動化經過含有黃曲霉素特異抗體的免疫親和柱凈化和富集后，目標化合物通過帶有三重四級桿質譜檢測器的高效液相色譜儀進行測定，建立了中藥材中黃曲霉毒素高靈敏度的前處理和分析方法，并進行三種常見中藥材（陳皮、人參、當歸）中黃曲霉毒素的加標回收驗證，平均回收率在84.5~101.3%之間，RSD小于10%。

2.儀器、耗材

儀器

Raykol Fotector Plus 高通量全自動固相萃取儀

Raykol Auto EVA-60 全自動平行濃縮儀

Raykol AH-30 全自動均質器

Raykol Auto Prep 200 全自動液體樣品處理工作站

高效液相色譜（HPLC）：Agilent 1200

質譜檢測器 (MS)：Agilent 6430

耗材

黃曲霉毒素免疫親和柱

試劑

緩沖液：稱取25 g氯化鈉、5 g碳酸氫鈉溶于水中，加入0.1 mL吐溫-20，用水稀釋至1000 mL即得淋洗緩沖液。

使用Auto Prep 200全自動液體樣品處理工作站配制黃曲霉毒素混合標準工作液，具體配制方法如圖-1所示：

圖-1 Auto Prep 200 黃曲霉毒素混合溶液配制方法

空白基質溶液用Auto EVA -60全自動平行濃縮儀氮吹后，分別加入1 mL上述混合標準工作溶液復溶，過0.22 μm的有機相濾膜后配制成基質混合工作溶液，供液相色譜-質譜聯用儀測定。

3.樣品提取與前處理

陳皮、人參、當歸試樣前處理

準確稱取15 g試樣于120 mL離心管中，加入3 g氯化鈉及75 mL甲醇-水溶液（7:3，V/V），12000轉/分鐘攪拌速度下均質2 min，離心5 min（轉速4000 r/min）。準確量取15 mL上層提取液于50 mL容量瓶中，用水定容、取30 mL至50 mL離心管中, 離心10 min（轉速4000 r/min），最后準確移取20 mL上清液至80 mL玻璃上樣管，待凈化用。