027315 MRS培養(yǎng)基(莫匹羅星鋰鹽改良MRS培養(yǎng)基基礎(chǔ))

　　(Man Rogosa Sharpe Medium)(Li-Mupirocin Modified MRS Medium Base)

　　用 途：

　　MRS培養(yǎng)基用于乳酸菌的分離、計數(shù)和培養(yǎng)。(GB/T 4789.35-2010，SN/T1941.1-2007和ISO標(biāo)準(zhǔn))

　　原 理：

　　蛋白胨、牛肉膏粉、酵母膏粉提供氮源、維生素、生長因子;葡萄糖為可發(fā)酵糖類;磷酸氫二鉀為酸堿緩沖劑;檸檬酸三銨、硫酸鎂、硫酸錳、吐溫-80和乙酸鈉為培養(yǎng)各種乳酸菌提供生長因子，其成分還能抑制某些雜菌;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。

　　MRS培養(yǎng)基配方(每升)：

　　蛋白胨 10g

　　牛肉膏粉 5g

　　酵母膏粉 4g

　　葡萄糖 20g

　　吐溫-80 1.08g

　　磷酸氫二鉀 2g

　　乙酸鈉 5g

　　檸檬酸三銨 2g

　　硫酸鎂(MgSO4.7H2O) 0.2g

　　硫酸錳(MnSO4.4H2O) 0.05g

　　瓊脂 15g

　　最終pH 6.2±0.2

　　使用方法

　　1、稱取本品64.3g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min，備用。

　　2、無菌操作將經(jīng)過充分搖勻的檢樣25g(或25mL)，放入含有225mL滅菌生理鹽水的滅菌廣口瓶內(nèi)，振搖均勻，即為1：10稀釋液，依次做1：100、1：1000……稀釋。

　　3、將培養(yǎng)基涼至50℃左右，注入平皿中約15mL，待瓊脂凝固。

　　4、選擇2-3個合適的稀釋度，分別在做10倍遞增稀釋的同時，吸取0.1mL稀釋液于平皿上，用L型棒涂布，每個稀釋度做2個平皿。翻轉(zhuǎn)平板，乳桿菌在兼性厭氧條件，雙歧桿菌在厭氧條件下，混合菌應(yīng)分別兼性厭氧和厭氧條件下，36±1℃培養(yǎng)48h。

　　5、選擇菌落數(shù)在30-300個之間的平皿進(jìn)行計數(shù)，并乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)，以10的指數(shù)表示進(jìn)行報告。

　　質(zhì)量控制：

　　下列質(zhì)控菌株接種后于36℃±1℃兼性厭氧培養(yǎng)48h結(jié)果如下：

　　貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。

　　規(guī) 格：250g

　　參考文獻(xiàn)：

　　1.GB/T4789.35-2008 中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗標(biāo)準(zhǔn) 乳酸菌檢驗

　　2.GB 4789.35-2010 中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗標(biāo)準(zhǔn) 乳酸菌檢驗

　　3.SN/T1941.1-2007 中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 進(jìn)出口食品中乳酸菌檢驗方法 第1部分 分離與計數(shù)方法。

　　4.ISO 15214-1998 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for the emumeration of mesophilic lactic acid bacteria-----Colony-count technique at 30℃.